25-羟基维生素D(25-OH-D)测定试剂盒（磁微粒化学发光法）

京械注准20202400231

京械注准20202400231

北京市北京经济技术开发区凉水河二街8号院4号楼3层101-301、302（北京自贸试验区高端产业片区亦庄组团）

天津市北辰区永康道12号2号楼1层、4层（委托生产）（统一社会信用代码：91120113MA069QCM9X）

25-羟基维生素D(25-OH-D)测定试剂盒（磁微粒化学发光法）

第二类

100人份/盒、200人份/盒、100人份;5/盒

注：校准品靶值、质控品质控范围批特异、具体浓度详见标签。校准品溯源至企业工作校准品。

本产品用于体外定量检测人血清中的25-羟基维生素D(25-OH-D)的含量。

在2℃～8℃储存，有效期为18个月。

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其它内容

北京市药品监督管理局

2020-06-01

2025-05-31

生产地址：京械注准20202400231：北京市通州区科创东五街2号14幢4层，北京市通州区科创东五街2号13幢2层F2C 变更为北京市通州区科创东五街2号14幢4层。 (批准日期：20211102)。 重庆科斯迈SMART500、SMART6500化学发光测定仪 变更为 1、重庆科斯迈SMART500、SMART6500型号化学发光测定仪。 2、深圳迎凯Shine i2100型号化学发光免疫分析仪。 3、北京华科泰SAVANT 2000型号化学发光免疫分析仪。 。 (批准日期：20211102)。 住所：北京市通州区科创东五街2号14幢4层F4E变更为北京市北京经济技术开发区（通州）科创东五街2号14幢2层F2F；生产地址：京械注准20202400231：北京市通州区科创东五街2号14幢4层变更为天津市北辰区永康道12号2号楼1层、4层。 (批准日期：20220316)。 住所：北京市北京经济技术开发区（通州）科创东五街2号14幢2层F2F变更为北京市北京经济技术开发区凉水河二街8号院4号楼3层101-301、302（北京自贸试验区高端产业片区亦庄组团）。 (批准日期：20221101)。 包装规格变化： 100人份/盒、100人份;5/盒 变更为 100人份/盒、200人份/盒、100人份;5/盒 ； 产品储存条件及有效期变化： 在2℃～8℃下储存，有效期为12个月。 变更为 在2℃～8℃储存，有效期为18个月。 ； 产品技术要求、说明书变化： 产品技术要求： 2.3 准确度 用美国国家标准与技术研究院（NIST）的维生素D标准物质（SRM 972a）作为样品进行检测，实测值与标示值的相对偏差在plusmn;15%范围内。 2.5重复性 分别检测高、低两水平样本，重复性（CV%）应不高于10.0%。 2.6批间差 分别检测高、低两水平样本，批间差（CV%）应不高于15.0%。 2.8特异性 2.10 稳定性 2.10.1稳定性可选用以下其中一种方法进行验证： 2.10.1.1 2℃～8℃储存，有效期12个月，效期后分别检测2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项，其结果应符合各项要求。 2.10.1.2 取有效期内的试剂盒在37℃放置7天，分别检测2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项，其结果应符合各项要求。 2.10.2 复溶稳定性 2.10.2.1 校准品开瓶后（复溶后），-20℃以下储存，有效期1个月，效期后分别检测2.3、2.4、2.5、2.7、2.8项，其结果应符合各项要求。 2.10.2.2 质控品开瓶后（复溶后），-20℃以下储存，有效期1个月，效期后分别检测2.5、2.9项，其结果应符合各项要求。 3.3准确度 用美国国家标准与技术研究院（NIST）的维生素D标准物质（SRM 972a）作为样品进行检测，每个水平重复测定3次，测试结果记为（），按式（1）分别计算相对偏差（），如果3次结果都符合2.4的要求，即判为合格。如果大于等于2次的结果不符合，即判为不合格。如果有1次结果不符合要求，则应重新连续测试20次，并按照式（1）计算相对偏差，如果大于或等于19次测试的结果符合2.3的要求，则判为合格，准确度符合2.3的要求。 3.8 特异性 测定400ng/mL维生素D2和400ng/mL维生素D3的交叉反应物质，检测3次，测定结果应符合2.8的要求。 3.9 质控品赋值有效性 在试剂盒线性范围内,测定两个浓度的质控品，各检测3次，测定结果均应符合2.9的要求。 3.10 稳定性 3.10.1 稳定性可选用以下其中一种方法进行验证： 3.10.1.12℃～8℃储存，有效期12个月，效期后按照3.3、3.4、3.5、3.7、3.8要求进行操作，结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8要求。 3.10.1.2 取有效期内的试剂盒在37℃放置7天，按照3.3、3.4、3.5、3.7、3.8要求进行操作，结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8要求。 3.10.2 复溶稳定性 3.10.2.1 校准品开瓶后（复溶后），-20℃以下储存，有效期1个月，效期后分别按照3.3、3.4、3.5、3.7、3.8要求进行操作，结果应符合2.3、2.4、2.5、2.7、2.8要求。 3.10.2.2 质控品开瓶后（复溶后），-20℃以下储存，有效期1个月，效期后分别按照3.5、3.9要求进行操作，结果应符合2.5、2.9要求。 附录A 校准品溯源性说明 / 1.工作校准品原料的赋值 此分析物无国家一级标准品。采用25-羟基维生素D(25-OH-D)校准品原料（来源于化学合成，纯度要求大于80%）作为配制工作校准品的原料，用通过国家指定检测机关校验过的移液器准确吸取一定量校准品稀释液，将原料稀释成线性范围内3个浓度点。 采用罗氏的25-羟基维生素D(25-OH-D)试剂盒检测稀释液以及稀释以后的样本，每个样本点测20遍，求平均值，将每个稀释样本测值减去稀释样本本底值后乘以稀释倍数即为该稀释样本反算后原料浓度值，三个不同稀释比例样本反算原料浓度值的平均值即为该原料实际标定值。 2.工作校准品赋值验证 取已赋值的25-羟基维生素D(25-OH-D)原料作为配制工作校准品的原料。取一定原料，经过系列过渡稀释，混匀配制使其最终浓度为1200ng/mL，作为工作校准品。 用通过国家指定检测机关校验过的移液器准确吸取一定量工作校准品，将工作校准品稀释成系列浓度120、60、30、15、5 ng/mL。即为系列工作校准品。 3.产品校准品的赋值 取已赋值的25-羟基维生素D(25-OH-D)原料作为配制产品校准品的原料。用校准品稀释液稀释成120、60、30、15、5 ng/mL，用工作校准品做标准曲线，采用配套试剂盒反应体系，检测120、60、30、15、5 ng/mL校准点，每个校准点重复10次，求平均值及标准偏差SD。要求精密度小于10%，相对误差小于15%。 4. 不确定度 工作校准品的不确定度为： 产品校准品的不确定度为： 式中： 表示：系列工作校准品的不确定度，其中i=1.2.3.4.5...。 表示：将标准原料稀释成系列工作校准品时，配制过程所带来的不确定度，其中t=1.2.3.4.5...。 表示：将标准原料稀释成系列校准品时，所使用的移液器带来的不确定度。 在移液器没有明确标明不确定度时，，其中表示：移液器最小刻度。，其中=1.2.3.4.5，表示：配制各浓度标准点所需要量取的体积，表示：各标准点浓度。 表示：标定系列工作校准品时重复试验的标准偏差。 表示：标定产品校准品时重复试验的标准偏差。 要求每个标准点的总不确定度绝对值不大于该标准点浓度值的10%。 附录B 质控品赋值说明 1. 质控品定值过程 1.1 定值系统 1.2 定值系统验证 根据适用仪器选择定值系统。在适用仪器上，采用步骤1.1中列出的定值系统，测定质控品，每个样品测定3次，每次测定结果均在可接受范围内，则认为系统运行正常。 1.3定值 采用本公司25-羟基维生素D（25-OH-D）测定试剂盒（磁微粒化学发光法）及其配套校准品、化学发光免疫分析仪作为定值系统。在3天内至少做20次的检测。检测结果依据格拉布斯（Grubbs）准则剔除异常值，将20个有效检测结果计算均值，作为质控品的初定值。 1.4 确定质控范围 以初定值为标示值，参考美国临床实验室改进修正案prime;88（CLIAprime;88）能力验证分析质量要求，设定质控范围；对于未给出可接受范围的项目，则参考第4版《全国临床检验操作规程》中根据生物学变异确定的总误差要求。质控品质控范围必须等同或小于CLIAprime;88给出的可接受范围或生物学变异总误差。由于CLIAprime;88及生物学变异总误差均未给出25-OH-D项目的对应指标，本公司处理其定值数据后，按照95%置信区间设定其质控范围。具体质控范围如下： 2. 质控品原料说明 本质控品中主要原料为25-羟基维生素D(25-OH-D)抗原（来源于化学合成），纯度要求大于80%。原料浓度值每批具体见厂家报告，按照厂家标示值，准确移取一定量的原料，按一定比例稀释，制备样品浓度在试剂盒测定线性范围内，在化学发光免疫分析仪上，用本公司相应试剂盒检测，返算的原料浓度应不低于厂家标示值的85%。 3. 制备 3.1准备血清基质 3.2 配制 产品说明书： 【检验原理】 本试剂盒采用竞争法测定人体中25-羟基维生素D(25-OH-D)的含量。 第一步，25-羟基维生素D校准品或待测血清与碱性磷酸酶标记的25-羟基维生素D抗原同时竞争生物素化的抗25-羟基维生素D抗体，形成复合物； 第二步，再加入包被链霉亲和素的磁微粒后，该复合物通过生物素和链霉亲和素之间的反应结合到磁微粒上。 充分洗涤后加入发光底物测定其发光强度（RLU），根据标准曲线即可算出样品中25羟基维生素D的含量，样品的RLU值随25-羟基维生素D浓度的增加而降低。 【储存条件及有效期】 3、不同批号的组分不得混用，各组分在2℃～8℃可稳定至试剂成品盒标明的失效期，生产日期及失效日期见标签。 【样本要求】 本试剂盒用于对血清样本的测定。标本无需特殊处理，采用常规医用技术收集全血标本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在4天之内使用，可于2℃～8℃保存，若需长期存放应保存在-20℃以下（不超过6个月），并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。 【检验方法】 校准 1、校准范围：5 ng/mL～120 ng/mL。 【参考区间】 / 通过对120例正常人群样本测试，采用百分位数统计方法（P2.5～P97.5）计算： 正常参考区间：5.1～49.8 ng/mL。以上参考区间仅供参考，各实验室应建立自己的正常值。 【检验结果的解释】 3、本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 / 【检验方法的局限性】 / 【注意事项】 5、由于方法学或抗体特异性等原因，使用不同生产商的试剂对同一份样本进行的检测可能会得到不同的检测结果，因此在监测过程中，用不用试剂检测所得的结果不应直接相互比较，以免造成错误的医学解释。 6、建议实验室在发给临床医生的检测报告注明所用试剂的特征。系列监测中如果改变试剂类型，则因进行额外的连续性检测并与原有试剂结果进行平行比较以重新确定基线值。 【标识的解释】 【参考文献】 [1]江巍,高凤荣等.维生素D缺乏相关性疾病研究进展 [J].中国骨质疏松杂志,2014,20(3):331-337. [2]江苏,淮安等.孕妇维生素D缺乏对胎儿的影响研究[J].实用妇科内分泌杂志,2016,3(13):57-58. 变更为 产品技术要求： 2.3 准确度 用美国国家标准与技术研究院（NIST）的维生素D标准物质作为样品进行检测，实测值与标示值的相对偏差在plusmn;15%范围内。 2.5重复性 分别检测高、低两水平样本，重复性（CV）应不高于8%。 2.6批间差 分别检测高、低两水平样本，批间差（CV）应不高于10%。 2.8特异性 2.10 稳定性 / 3.3准确度 根据试剂盒的线性范围，用美国国家标准与技术研究院（NIST）的维生素D标准物质作为样品进行检测，每个水平重复测定3次，测试结果记为（），按式（1）分别计算相对偏差（），如果3次结果都符合2.3的要求，即判为合格。如果大于等于2次的结果不符合，即判为不合格。如果有1次结果不符合要求，则应重新连续测试20次，并按照式（1）计算相对偏差，如果大于或等于19次测试的结果符合2.3的要求，则判为合格，准确度符合2.3的要求。 3.8 特异性 测定400ng/mL1,25-二羟基维生素D2（1,25（OH）2D2）和400ng/mL1,25-二羟基维生素D3（1,25（OH）2D3）的样本，检测3次，测定结果应符合2.8的要求。 3.9 质控品赋值有效性 高值、低值浓度的质控品分别检测3次，3次测定结果均应符合2.9的要求。 3.10 稳定性 / 附录A 校准品溯源性说明 选定测量程序： 采用罗氏的25-羟基维生素D试剂盒及其配套仪器组成的测试系统。 常设测量程序： 北京华科泰生物技术股份有限公司的工作校准品及其配套仪器组成的测试系统。 量值从工作校准品传递至产品校准品之间的过程： 本试剂盒建立溯源至罗氏25-羟基维生素D试剂盒的溯源链。以罗氏为参照，建立25-羟基维生素D溯源链，用于对选定测量程序通过血清传递校准，再用该测量程序通过血清传递对工作校准品赋值，对常设测量程序校准。用常设测量程序为产品校准品赋值，产品校准品用于用户常规测量程序的校准，使用户的最终检测结果实现了完整的溯源性。 A1.工作校准品原料的赋值 此分析物无国家一级标准品。采用25-羟基维生素D(25-OH-D)抗原作为配制工作校准品的原料，用通过国家指定检测机关校验过的移液器准确吸取一定量的原料和基质血清，将原料稀释成线性范围内3个浓度点。采用选定测量程序检测基质血清以及稀释以后的样本，每个样本点测20遍，求平均值，将每个稀释样本测值减去基质血清测值后乘以稀释倍数即为该稀释样本反算后原料浓度值，三个不同稀释比例样本反算原料浓度值的平均值即为该原料实际标定值。 A2.工作校准品赋值验证 取标定过的25-羟基维生素D(25-OH-D)抗原作为配制工作校准品的原料。取一定原料，经过系列过渡稀释，目标浓度为2400ng/mL，经选定测量程序赋值作为工作校准品。 用通过国家指定检测机关校验过的移液器准确吸取一定量工作校准品，将工作校准品稀释成系列浓度120、60、30、15、5 ng/mL。经选定测量程序赋值，即为系列工作校准品。 A3.工作校准品互换性验证 同时使用选定测量程序和常设测量程序，测量工作校准品和一组相关的血清样本，评估工作校准品的互换性。 利用血清样本及工作校准品重复测定结果的均值(使用不同符号)作散点图，Y轴为常设测量程序结果，X轴为选定测量程序结果。选定线性回归进行分析，方程：。 将选定测量程序测定均值作为X轴，计算每个制备样本的Y值的95%置信区间，如果常设测量程序的测定均值落在该区间内，说明该制备样本对常设测量程序无基质效应，表明该物质在选定测量程序和常设测量程序间具有互通性。 A4.产品校准品的赋值 取经工作校准品标定的25-羟基维生素D(25-OH-D)抗原作为配制产品校准品的原料。用校准品稀释液稀释成120、60、30、15、5 ng/mL，用工作校准品做校准曲线，采用配套试剂盒反应体系，检测120、60、30、15、5 ng/mL校准点，每个校准点重复10次，求平均值及标准偏差SD。要求重复性小于8%，相对偏差应在plusmn;10%范围内。 A5. 不确定度 A5.1 校准品定值引入的相对不确定度 式中： mdash;mdash;工作校准品引入的相对不确定度； mdash;mdash;测量不精密度引入的相对不确定度； mdash;mdash;其他定值相关的相对不确定度。 A5.2 校准品定值引入的标准不确定度 式中： mdash;mdash;校准品赋值 A5.3 校准品的合成标准不确定度 式中： mdash;mdash;均匀性引入的不确定度； mdash;mdash;稳定性引入的不确定度。 A5.4 校准品的扩展不确定度 式中： mdash;mdash;包含因子，一般取（包含概率约95%）。 附录B 质控品赋值说明 B1. 质控品定值过程 B1.1 定值系统 B1.2定值及确定质控范围 采用本公司25-羟基维生素D（25-OH-D）测定试剂盒（磁微粒化学发光法）及其配套校准品、适用仪器作为定值系统。至少做20次的检测。检测结果依据格拉布斯（Grubbs）准则剔除异常值，将有效检测结果计算均值，作为质控品的初定值，按照初定值plusmn;3SD设定其质控范围。 B2. 质控品原料说明 本质控品中主要原料为25-羟基维生素D(25-OH-D)抗原（来源于化学合成），纯度要求大于80%。原料浓度值每批具体见厂家报告，按照厂家标示值，准确移取一定量的原料，按一定比例稀释，制备样品浓度在试剂盒测定线性范围内，在适用仪器上，用本公司相应试剂盒检测再返算原料浓度。 B3. 制备 B3.1准备血清基质 B3.2 配制 产品说明书： 【检验原理】 本试剂盒采用竞争法测定人体中25-羟基维生素D(25-OH-D)的含量。 第一步，25-羟基维生素D校准品或待测血清与碱性磷酸酶标记的25-羟基维生素D抗原同时竞争生物素化的抗25-羟基维生素D抗体，形成免疫复合物； 第二步，在加入包被链霉亲和素的磁微粒后，该免疫复合物通过生物素和链霉亲和素之间的反应结合到磁微粒上。 充分洗涤后加入发光底物测定其发光强度（RLU），根据校准曲线即可算出样品中25羟基维生素D的含量，样品的RLU值随25-羟基维生素D浓度的增加而降低。 【储存条件及有效期】 3、在一个固定的试剂架内，不同批号试剂各组分不可以互换；未开封的各组分在2℃～8℃可稳定至试剂成品盒标明的失效期，生产日期及失效日期见标签。 【样本要求】 本试剂盒用于对血清样本的测定。样本无需特殊处理，采用常规医用技术收集全血样本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在4天之内使用，可于2℃～8℃保存，若需长期存放应保存在-20℃以下（不超过6个月），并避免反复冻融。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸样本。 【检验方法】 校准 1、校准范围：0ng/mL～120 ng/mL。 【参考区间】 目前没有最佳维生素D值的标准，许多专家认为通常使用的基于人群的参考值太低，推荐用基于健康的参考值代替基于人群的参考值。[3]大多数专家认同维生素D缺乏应当定义为25-羟基维生素Dle;20ng/mL，维生素D不足定义为21-29ng/mL。[4]目前专家的比较统一的意见：对于一般性健康来说，理想的25-羟基维生素D浓度为30-100ng/mL。[4],[5],[6],[7] 通过对120例正常人群样本测试，采用百分位数统计方法（P2.5～P97.5）计算： 正常参考区间：5.1～49.8 ng/mL。以上参考区间仅供参考，各实验室应建立自己的正常值。 【检验结果的解释】 3、本试剂盒的检测结果仅供临床参考，不能单独作为确诊或排除病例的依据，为达到诊断目的，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。 4、本产品空白限应不高于3ng/mL。 【检验方法的局限性】 4、高于检测范围的样本可以用样本稀释液稀释。推荐的稀释倍数为2倍进行稀释，结果应乘以稀释倍数。可稀释的样本浓度必须不低于40 ng/mL。 【注意事项】 5、由于方法学或抗体特异性等原因，使用不同生产商的试剂对同一份样本进行的检测可能会得到不同的检测结果，因此在检测过程中，用不同试剂检测所得的结果不应直接相互比较，以免造成错误的医学解释。 6、建议实验室在发给临床医生的检测报告注明所用试剂的特征。系列监测中如果改变试剂类型，则应进行额外的连续性检测并与原有试剂结果进行平行比较以重新确定基线值。 9、本产品仅用于体外诊断。 【标识的解释】 【参考文献】 [1]江巍,高凤荣等.维生素D缺乏相关性疾病研究进展 [J].中国骨质疏松杂志,2014,20(3):331-337. [2]江苏,淮安等.孕妇维生素D缺乏对胎儿的影响研究[J].实用妇科内分泌杂志,2016,3(13):57-58. [3] Bischoff-Ferrari HA,et al.Estimation of optimal serum concentrations of 25-hydroxyvitamin D for multiple health outcomes[J].Am J Clin Nutr, 2006,84:18-28. [4] Holick MF.Vitamin D status:measurement,interpretation and clinical application[J].Ann Epidemiol, 2009,19(2):73-78. [5] Souberbielle JC,Body JJ,Lappe JM,et al.Vitamin D and musculoskeletal health,cardiocascular disease,autoimmunity and cancer:Recommendations for clinical practice[J].Autoimmun Rev, 2010,9:709-715. [6] Dawson-Hughes B,et al.Estimates of optimal vitamin D status[J].Osteoporos Int, 2005,16:713-716. [7] Vieth R,et al.The urgent need to recommend an intake of vitamin D that is effective[J].Am J Clin Nutr, 2007,85:649-650. ； 适用仪器变化： 1、重庆科斯迈SMART500、SMART6500型号化学发光测定仪。 2、深圳迎凯Shine i2100型号化学发光免疫分析仪。 3、北京华科泰SAVANT 2000型号化学发光免疫分析仪。 变更为 1、重庆科斯迈生物科技有限公司SMART500、SMART6500型号全自动化学发光测定仪。 2、深圳迎凯生物科技有限公司Shine i2100型号全自动化学发光免疫分析仪。 3、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 2000型号全自动化学发光免疫分析仪。 4、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 8000型号全自动化学发光免疫分析仪。 ； 其他可能改变产品安全有效性的变化： 主要组成成分： 注：校准品靶值、质控品质控范围批特异、具体浓度详见标签。 校准品溯源至企业工作校准品。 未提供所需物品： ●反应杯(1000mu;L) ● 全自动免疫检验系统用底物液 ●清洗液 变更为 主要组成成分： 注：校准品靶值、质控品质控范围批特异、具体浓度详见标签。 校准品溯源至企业工作校准品。 未提供所需物品： ●反应杯(1000mu;L) ●全自动免疫检验系统用底物液（津械备20200120号） ●清洗液（津械备20200121号） 。 (批准日期：20240307)。 适用仪器变化： 1、重庆科斯迈生物科技有限公司SMART500、SMART6500型号全自动化学发光测定仪。 2、深圳迎凯生物科技有限公司Shine i2100型号全自动化学发光免疫分析仪。 3、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 2000型号全自动化学发光免疫分析仪。 4、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 8000型号全自动化学发光免疫分析仪。 变更为 1、重庆科斯迈生物科技有限公司SMART6500型号全自动化学发光测定仪。 2、深圳迎凯生物科技有限公司Shine i2100型号全自动化学发光免疫分析仪。 3、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 2000型号全自动化学发光免疫分析仪。 4、北京华科泰生物技术股份有限公司SAVANT 8000型号全自动化学发光免疫分析仪。 。 (批准日期：20240722)。 生产地址：天津市北辰区永康道12号2号楼1层、4层变更为天津市北辰区永康道12号2号楼1层、4层（委托生产）。 (批准日期：20240607)